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sds聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds聚丙烯酰胺凝胶电泳条带分析)
电泳,蛋白质,分子量sds聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds聚丙烯酰胺凝胶电泳条带分析)
发布时间:2019-02-08加入收藏来源:互联网点击:
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sds-page凝胶电泳原理是什么?
作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷。
在电场的作用下,带电粒子能在聚丙烯凝胶中迁移,其迁移速度与带电粒子的大小、构型和所带的电荷有关。十二烷基磺酸钠(SDS)能与蛋白质的结合,改变蛋白质原有的构象,使其变成近似于雪茄烟形的长椭圆棒,其短轴长度一样,而长轴与分子量大小成正比。
SDS-PGAE简介
原理:将蛋白质溶液与SDS(十二烷基硫酸钠)混合,SDS为界面活性剂会破坏蛋白质的二级结构使其变性,并包覆变性蛋白质,使其带有一致的负电荷(大约每两个氨基酸一个SDS)和一致的形状(长条形)。如果没有SDS使其负电荷一致,可能会使有相近分子量的蛋白质。
分布于不同的位置,此种电泳法为原态胶体电泳(Native-PAGE)。进行电泳时,分子量较小的较容易落下,相反的分子量较大的则卡在起点附近。虽然较大的电压可以缩短实验的时间,却会得到较模糊的结果,因此实验长达数个小时。
以上内容参考:
百度百科——SDS-PGAE
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理及应用,主要是应用哦,查了很多资料都没有找到,拜托各位了?
丙烯酰胺聚合成网状结构。蛋白与SDS形成聚合体,消除了蛋白本身的电荷,统一带负电,那么在电泳中它的泳动速度只跟分子量大小有关。
从而能达到分离不同分子量蛋白的目的。主要用在检定蛋白混合物中的目的蛋白含量,或是电泳后用于WB分析。
扩展资料:
聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带,如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质,蛋白质样品电泳后,就应只分离出一条区带。
SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合形成密度相同的短棒状复合物,不同分子量的蛋白质形成的复合物的长度不同,其长度与蛋白质分子量呈正相关,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。
本文到此结束,希望对大家有所帮助呢。
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