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多肽,方法,胆固醇dcm试剂(dcm试剂接触皮肤)

发布时间：2019-02-08加入收藏来源：互联网点击：

血脂各指标测定方法有哪些？

在进行生物化学检查时，经常确认4种血脂：甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇。一般甘油的正常范围低于1.7mmol/L，超过2.3mmol/L会导致身体损伤。高密度脂蛋白胆固醇是一种很好的胆固醇，可以将血管内皮的胆固醇从外周运到肝脏，因此被称为可以去除外周胆固醇的胆固醇水平，因此该数值升高，心血管疾病的风险降低，正常值通常在1.0mmol/L以上。低密度脂蛋白胆固醇是肝脏合成脂蛋白携带的胆固醇，将胆固醇运输到周围组织中使用，低密度脂蛋白胆固醇水平升高会增加心脑血管疾病的危险，因此低密度脂蛋白胆固醇的正常范围不同。如果这个人没有心血管疾病的危险，一般认为低密度脂蛋白胆固醇值低于3.4mmol/L就可以了。但是，如果糖尿病、高血压或颈动脉斑块形成已经出现，则该患者的正常范围可能在2.6mmol/L以下，需要1.8~2.6mmol/L。如果一些更严重的患者已经出现血管疾病，如冠心病、下肢血管闭塞、颈动脉狭窄的70%以上，这部分患者的正常范围应在1.8mmol/L以下。因此，不同人群的正常范围不同，或者适当范围不同，所以可能会更加合理。(大卫亚设)1。血清TC测定：化学提取法--ALBK法是目前国际上通用的参考方法。卫生部北京老年医学研究所生物化学室建立的高效液相色谱(HPLC)法也被推荐为我国TC测量的参考方法。推荐的酶法【胆固醇氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和苯酚(CHOD-PAP法)】(用胆固醇酯酶水解血清中的胆固醇酯，用胆固醇氧化酶将胆固醇氧化成胆固醇，产生过氧化氢。终点产物测定是Trinder显色反应系统应用最广泛的。)将血清TC作为临床实验室测定的常用方法。2.血清TG测定：目前没有公认的TG测定的参考方法。二氯甲烷-硅酸-变色酸法是美国疾病预防控制中心(CDC)测定TG的参考方法。卫生部北京老年医学研究所成立的HPLC将推荐测定总甘油和游离甘油的方法作为我国TG测定的参考方法。推荐使用酶法[如甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基锑和苯酚法(GPO-PAP法)]作为临床实验室测定血清TG的常用方法。一般临床实验室可以使用第一阶段GPO-PAP方法，有条件的实验室(如三级以上医院)需要考虑游离甘油测定或第二阶段酶法。3.血清HDL-C测定：超速离心力结合ALBK法是HDL-C测定的参考方法。硫酸葡聚糖-镁沉淀法(DS法)结合ALBK法，以美国胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)为指定的比较方法(DCM法)。1995年，中华医学会检验分会确认了国内推荐的磷、钨、镁沉淀法(PTA-Mg2法)，但该方法的主要缺点是需要对标本进行提前离心处理。结果很容易受到高TG的影响。建议采用均匀测定法作为临床实验室测定血清HDL-C的常用方法。可以选择的方法主要有清洁方法(Clearance method)、PEGME方法、反应促进剂-过氧化物酶去除法(SPD方法)、过氧化氢酶去除法(CAT方法)、选择性抑制法(PEGME方法)4.血清LDL-C测定：超速离心力结合ALBK法是LDL-C测定的参考方法。1995年，中华医学会检验学会在国内推荐了聚乙烯硫酸沉淀法(PVS法)作为LDL-C测定的常规方法，但该方法的主要缺点是样品需要提前离心处理。结果很容易受到高TG的影响。建议采用均匀测定法作为临床实验室测定血清LDL-C的常用方法。可以选择的方法有表面活性剂去除法(SUR法)、过氧化氢酶去除法(CAT法)、杯状定向法(CAL法)、水溶性反应法(SOL法)、保护性试剂法(PRO法)。

5.血清apoAI和apoB测定：目前没有公认的血清apoAI和apoB测定的参考方法。目前临床实验室测定血清apoAI、apoB含量的方法主要有酶联合免疫吸附试验(ELISA)和免疫浊度法[包括免疫产卵比浊法(INA)和免疫比浊法(ITA)]。免疫浊度法是临床实验室测定血清apoAI、apoB的常用方法，首选ITA方法，其次推荐INA方法。6.血清Lp(a)测定：目前没有公认的血清Lp(a)测定的参考方法。目前临床实验室测定血清Lp(a)的方法主要是ELISA和免疫浊度法，其中ITA法最常用。推荐免疫浊度法作为临床实验室测定血清Lp(a)的常用方法。试剂用抗体必须是多克隆抗体或混合数株识别apo(a)不同抗原部位的单克隆抗体。首选ITA方法，其次是INA方法。

多肽固相合成法的发明

多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法

多肽的合成是反复添加氨基酸的过程，一般由C端合成为N端(氨基端)。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端连接到共价键和固相载体上，以氨基酸N端作为合成的起点，通过脱氨基保护器和过度激活的第二个氨基酸进行反应，连接长肽链，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂中分解、纯化，获得目标多肽。

1、Boc多肽合成方法

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Boc方法是经典的多肽固相合成法，以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基，苄醇类作为侧链保护基，Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上，TFA切除Boc保护基，N端用弱碱中和。

肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行，最终采用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中，为了便于下一步的多肽合成，反复用酸进行脱保护，一些副反应被带入实验中，例如多肽容易从树脂上切除下来，氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。

2、Fmoc多肽合成法

Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法――Fmoc多肽合成法。

Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的，不受TFA等试剂的影响，应用温和的碱处理可脱保护，所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。

肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成，避免了采用强酸。同时，与Boc法相比，Fmoc法反应条件温和，副反应少，产率高，并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收，易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。

本文到此结束，希望对大家有所帮助呢。