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dpbs(大谱表是什么意思)
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发布时间:2020-12-06加入收藏来源:互联网点击:
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用于观察线粒体的荧光染色剂
罗丹明123染色检测线粒体膜电位
外观:红棕色粉末
化学名:Rh123罗丹明123
别名:Rhodamine123;Rh123
分子式:C21H17CLN2O3
分子量:380.82
配制:罗丹明123粉剂用甲醇配成1mg/mlde储备液,染色时用DPBS缓冲液将其稀释为所需浓度
保存:冰箱-20度避光
一、检测原理:
罗丹明123(Rhodamine123)是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料,是一种线粒体跨膜电位的指示剂。其在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质,荧光强度减弱或消失。而在凋亡发生时,线粒体膜完整性破坏,线粒体膜通透性转运孔开放,引起线粒体跨膜电位(ΔΨm)的崩溃,Rh123重新释放出线粒体,从而发出强黄绿色荧光,可用荧光显微镜、荧光光度计或流式细胞仪检测,通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化和凋亡的发生,可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。
二、使用方法:
1.细胞染色及分析
(1)培养细胞1×106/mL重悬于培养基中;
(2)加入罗丹明123染液0.1μg/mL~50μg/mL(根椐细胞种类不同而浓度不同,一般3~10μg/mL);
(3)37℃,5%CO2细胞培养箱孵育1~30min(根椐细胞种类不同而不同,一般10min);
(4)离心以培养基洗细胞两次;
2.组织提取的线粒体染色及分析
(1)按常规方法提取的线粒体,用适量的1×AssaysBuffer(将5×AssaysBuffer用水稀释5倍)重悬;
(2)常规方法进行蛋白含量测定后,用1×AssaysBuffer调配成3mg/mL的线粒体溶液;
(3)取2mL1×AssaysBuffer和1mL线粒体溶液;
(4)加入适量待测化合物(同时设空白对照组),250C保温min;
(5)加入罗丹明123染液10μL;
(6)荧光光度计检测:上述混合液全部加入石英比色皿中,置于250C下测定,激发波长488~505nm,发射波长530nm,连续记录从0min~30min内荧光强度的变化。
三、注意事项
1、操作时需戴手套
2、罗丹明123为通透性染料,可以自由进入细胞
3、孵育时,必须避免光照
4、使用时,避免污染母液
5、染色完成后,即刻进行荧光检测分析
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官网地址:#sthash.GoT9fnOV.dpbs
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Cyfe和iSpionage有点像,但最主要的目的是它可整合自己的网站SEO工具在同一个页面,包括社交媒体、Google分析工具等到,还能即时检测竞争对手的资讯,优点就在于它使用简单,排版和界面也非常讨人欢心。
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